1.临床症状 对称性分布的肢体近端肌无力，抗胆碱酯酶药物试验有某种改善应答，此为诊断该病的重要线索，疲劳现象和晨轻暮重为特征，另外部分患者发病首发于眼部(眼肌型)或脑神经损害症状(脑神经型)。2.实验室检查 新斯的明(或吡斯的明)试验：临床有典型的抗胆碱酯酶药物过敏反应者，依斯的明试验可助确诊，持续注射4～6小时，以每分钟0.1mg的速度注射，如在注射中症状突然明显改善，注射后症状持续稳定，则试验结果为阳性，应做重复试验以排除操作误差。3.神经电生理检查 经肌电图可帮助发现肌无力症的眼肌或脑神经损害定位。受累肌肉放电位募集减少，抗疲劳试验显示短期刺激下运动单位动作电位波幅渐进性降低，神经传导速度正常。必要时采用单纤维肌电图检查。4.眼底检查 有报道老年患者眼肌型应注意检查眼底，可发现视乳头水肿、视神经炎症状。5.肌活检和病理检查 对诊断有困难的重症肌无力，可采用肌活检协助诊断，与神经营养不良鉴别，主要是观察神经末梢有无囊性变，同时判断有无抗神经抗体。应用抗神经抗体的检测，对明确诊断有一定帮助，如抗抗体阳性可作为明确诊断的依据，抗抗体阴性的仅作为排除诊断。神经活体病理检查在一些特殊类型重症肌无力如抗抗体型重症肌无力有较大价值。