从二维超声来看，可以观察到房间隔的连续性中断，彩色多普勒显示心房水平左向右的分流。在存在肺动脉高压的情况下，还可以观察到右向左的分流，心腔的表现是右心腔扩大，肺动脉增宽。声学造影显示右房出现负性造影区，或者造影物从右房进入左房。

房间隔缺损可以通过定位进行诊断，主要分为原发孔型房间隔缺损和继发孔型房间隔缺损。在四心腔切面观察时，原发孔型房间隔缺损会导致回声中断，中断点位于房间隔下部靠近十字交叉的位置。而继发孔型房间隔缺损的回声中断部位位于房间隔的中部，在房室瓣之间或多或少仍残留着房间隔组织。

此外，还存在一种静脉窦型的房间隔缺损。在常规检查中，通过剑下双房观察可以看到上下腔静脉，但是通过经胸超声检查很难观察到这个部位。一般需要通过经食道超声才能清晰地观察到静脉窦型房间隔缺损的情况。