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银屑病患者血清可溶性apo/fas的表达
中华皮肤科杂志1999年第6期第32卷短篇论著
作者:张行程浩严建良茅晓红
单位:张行程浩310009杭州,浙江大学肿瘤研究所;严建良茅晓红浙江大学附属第二医院皮肤科
银屑病的发病机制的现代概念认为其与免疫-炎症网络和免疫活性细胞凋亡密切相关。为了进一步探讨银屑病发病与细胞凋亡和免疫应答调控的关系,我们对银屑病患者血清中的可溶性apo/fas(sapo/fas)进行了检测。
一、材料和方法
1.检测对象:40例临床和病理确诊的门诊或住院银屑病患者,其中寻常型进行期银屑病35例,脓疱型3例,红皮病型2例;男31例,女9例;年龄11~67岁,平均44.26岁。正常对照组30例均为本院健康献血员。各抽取静脉血2ml,分离血清后置-40℃保存待测。
2.实验方法:采用双抗体夹心elisa法。sapo-1/fas(cd95)elisa试剂盒购于美国biosource公司。具体步骤如下:将标本和标准品加入已包被抗人apo-1/fas单抗的96孔酶标板中与单抗结合,37℃孵育2h;加入生物素化抗人sapo-1/fas抗体,经酶联并与tmb底物显色;终止后在450nm处测a值。a450值与sapo-1/fas浓度之间关系成正比,绘制标准曲线,从中求得标本中sapo-1/fas浓度(单位pg/ml)。所有患者血清及对照血清均同步测定。
3.实验数据及统计处理采用spss软件统计包进行。显著性概率水平为0.05。
二、结果
40例银屑病患者的血清sapo-1/fas水平在0.55~67.25(16.99±15.76)pg/ml,其四分位间距为7.63~18.38pg/ml;30例正常对照组的血清sapo-1/fas水平在0.07~15.75(4.61±5.01)pg/ml,其四分位间距为0.50~7.40pg/ml;两者差异有显著性(p<0.01)。其中寻常型银屑病患者(35例)血清sapo-1/fas水平为2.34~67.25(16.67±15.00)pg/ml,其四分位间距为8.00~18.00pg/ml;脓疱型银屑病(3例)均数为9.76pg/ml,红皮病型(2例)均数为33.5pg/ml。寻常型与正常对照组差异有显著性(p<0.01)。因脓疱型及红皮病型例数较少,故未做显著性检验。
三、讨论
apo-1/fas(cd95)为相对分子质量48000的跨膜糖蛋白,属于tnf/ngf受体超家族,分布于正常人淋巴细胞及各种组织。apo-1/fas与其配体或某些抗体结合后可导致快速的细胞凋亡。当apo-1/fas以缺少跨膜区的可溶性形式出现时(sapo-1),则可阻止apo-1配体诱导的细胞凋亡[1]。我们的实验表明银屑病患者外周血中sapo-1显著增高,提示银屑病患者外周血单一核细胞(pbmc)表面的apo-1/fas有较多的跨膜区丢失,即银屑病患者的pbmc表面的apo-1/fas有缺陷。
我们检测的结果仅仅反映血液中的sapo-1/fas水平,至于皮损中的sapo-1/fas水平及其与cd4+t淋巴细胞的联系尚待进一步研究。我们的实验结果提示sapo-1/fas水平增高可能参与了银屑病的发病。此外红皮病型银屑病和脓疱型银屑病患者的sapo-1水平较高,推测病情的轻重可能与sapo-1水平有关。
参考文献
1tokanoy,miakes,kayagakin,etal.solublefasmoleculeintheserumofpatientswithsystemiclupuserythematosus.jclinimmunol,1996,16:261-265.
(收稿:1998-11-20修回:1999-03-01)