1.免疫学检查通过免疫组织化学检测ras2l和p53的表达，并确定肿瘤发生的基本原因。

2.组织病理学检查。横纹肌肉瘤的诊断是在肿瘤细胞的细胞质中发现横纹。这种条纹有时难以用苏木精-伊红(HE)染色来证实，但用Masson三色染色或磷钨酸-苏木精(PTAH)染色很容易发现。横纹肌肉瘤的形态学和细胞学特征非常广泛，正确的诊断不应该完全依赖于横纹肌的存在或不存在。在某些情况下，光镜无法发现水平条纹，但电子显微镜可以发现。对于在眶内发展迅速，儿童期有梭形肿瘤细胞的肿瘤，应考虑横纹肌肉瘤的可能，直至最终确认为其他类型的肿瘤。

横纹肌肉瘤一般呈块状，形状不规则，附着于眼球和眼眶结构(图3)。淡粉色，无包膜，质地柔软，像鱼一样嫩，可能有假包膜与周围脂肪组织分开。显微镜下，肿瘤细胞种类繁多，生长形态各异，从小的未分化圆形细胞到分化程度更高的条带、球拍状、蜘蛛状、巨细胞等。在分化良好的肿瘤细胞中可见水平条纹。根据主要细胞成分，横纹肌肉瘤可分为不同类型，可分为胚胎型、腺泡型和多形性型三种。

(1)胚胎型:肿瘤由胚胎发育不同阶段的横纹成肌细胞组成。几乎3/4的眼眶横纹肌肉瘤属于这种类型。显微镜下可见小块圆形和梭形细胞，均匀分布或排列成松散和紧密的带状。低分化肿瘤细胞呈圆形或梭形，细胞核大而深染，核仁不清。仅有少量嗜酸性胞浆，有丝分裂较多。梭形核位于中央，深染，两侧有细胞质。上述两类细胞之间混有分化良好的肿瘤细胞，呈带状、网球拍状或蝌蚪状，胞质丰富，嗜酸性染色，颗粒状，有纵横条纹(图4)。大多数肿瘤血管丰富，肿瘤细胞围绕血管排列。

(2)腺泡型:较胚胎型少见，但多形性较高。因其结构如肺小泡而得名。显微镜下，可以看到肿瘤细胞和纤维间隔的腺体排列(图5)。肿瘤细胞集中，被纤维血管隔膜分割成泡状，类似胚胎型横纹肌肉瘤的肿瘤细胞位于隔膜内。囊泡边缘可有数层卵圆形细胞，类似腺上皮，中央肿瘤细胞散在游离，类似腺腔。中央部分的细胞呈圆形，大小不一，可能有多核，有时纤维隔膜突出形成假乳头。腺泡排列和假乳头是该类型的组织学特征。此外，还有少数细胞有横纹，有助于诊断。

(3)多形性:常见于成年人，最少见。它由不同分化阶段的肿瘤细胞组成，其组织学特征高度多形性和异型性。梭形细胞是主要的，此外还有带状细胞和蝌蚪形细胞。这些细胞分化良好，比胚胎细胞体积大，形状规则。细胞内有丰富的细胞质，细胞质内有纵横条纹。

关于上述分型和组织学影像是否与预后有任何关系仍存在分歧。劳伦斯说，组织影像与预后无关，复发和死亡与组织学分类无关。

3.x线检查显示大部分眶腔增大，密度增加。这是因为横纹肌肉瘤发展迅速，到了临床上，肿瘤体积很大。肿瘤取代了脂肪组织，占据了大部分眼眶。x线片显示密度增高的软组织影。因为孩子正处于眼眶发育期，短时间的眶压增高可引起眶腔扩大。晚期仍可发现骨质破坏。

4.超声探查b超显示病灶为不规则低回声区或无回声区(图6)，仅在增益增大时有少许内部回声；如果无回声区表示出血腔，当增益增加时，将没有回声。在某些情况下，病灶内可能有带状回声间隔。肿瘤的声音衰减不显著，后边界显示清晰。当眼球被探头按压时，病变图像无明显变化，说明是实性病变，即无明显可压缩性。压迫病变眼球可使眼球壁曲率变平，甚至膨出至玻璃体腔内，这与肿瘤的快速生长有关。良性眼眶肿瘤虽然也会影响眼球的形状，但病变生长缓慢，眼外肌松弛，眼球突出有一个调整过程。除泪腺肿瘤因位置特殊可使球壁变形外，其他部位生长缓慢的肿瘤对球壁压力较小，导致眼球突出明显。当眶缘触及肿瘤时，探头还可以直接接触表面皮肤进行探查，不仅可以显示肿瘤的声学特性，还可以测量肿瘤的深度(图7)，对选择手术入路和术中操作具有重要意义。经彩色多普勒探查，肿瘤内可见丰富杂乱的彩色血流(彩图8)。脉冲多普勒检查可见肿瘤内动脉频谱，血流速度快。

5.CT扫描CT扫描不能对横纹肌肉瘤作出组织学诊断，但可根据病变的形态、边界、密度和骨质破坏等图像对肿瘤的性质作出估计。此外，它可以清楚地显示肿瘤的位置和范围，这对诊断和治疗计划具有重要价值。

大多数情况下，肿瘤位于眼眶上部，形状不规则，只有少数病例占据整个眼眶或位于眼眶后部，呈锥形或类圆形。当肿瘤边界不锐利或不光滑，肿瘤有坏死空洞或出血时，密度不均匀(图9)。CT值为34 ~ 60hu，静脉注射阳性造影剂后明显强化。肿瘤延伸到眼球表面，沿着巩膜生长。巩膜密度与肿瘤密度接近，两者界限不清。这种广泛的接触和缺乏边界通常被描述为铸造类型；除恶性肿瘤外，炎性假瘤、出血及其他侵袭性病变均可通过铸型观察到。肿瘤触及眶壁可见骨质破坏，就诊时约1/3病例可见明显骨质破坏。这种骨质破坏多发生在眼眶内壁和筛纸板(图10)等。如果病变位于眶尖，会伴有上壁骨破坏或眶上裂扩大。病变可扩散至筛窦和颅中窝。当眶尖被破坏时，肿瘤扩散至颅前窝(图11)。病变位于眼眶下部，破坏眶下壁，侵犯上颌窦或通过扩大的眶下裂扩散至翼腭窝和颞下窝。眼外肌受侵时可观察到肌肉肿胀。

6.在显示肿瘤的位置和形状方面，MRI与CT相同。其中T1WI呈中度或中度低信号，T2WI呈高信号。当肿瘤内有坏死腔和出血腔时，信号与实质区域不一致(图12)。T1WI和T2WI在出血灶区均呈高信号。在显示肿瘤与眼环关系方面，由于二者在T1WI上均为中等低信号，管型标本的变化较ct更为显著。