1.尿检显示尿中香草扁桃酸和高香草酸的排泄量增加。阳性患者有助于诊断。但阴性患者不能排除Rb。

2.当血-房水屏障完全时，房水中的乳酸脱氢酶(LDH)浓度高于血清中的浓度。当两者之比大于1.5时，说明有Rb的可能。乳酸脱氢酶(LDH)活性测定:当房水LDH值高于血清中值，且两者比值大于1.5时，强烈提示视网膜母细胞瘤的可能。

3.房水酶的测定。视网膜母细胞瘤患者房水和血浆中的乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸异构酶(PGI)升高，但在Coats病晚期，当视网膜广泛受损时，房水和血浆中的乳酸脱氢酶和磷酸异构酶也升高。

4.细胞学检查抽取房水或玻璃体进行细胞学检查，有助于本病的诊断和鉴别诊断，但通过眼壁的穿刺孔促使肿瘤向球外扩展是危险的，不宜轻易使用。腰穿抽取脑脊液细胞学检查和骨髓涂片检查对判断肿瘤是否转移有重要参考价值。

5.基因检查了解染色体情况。

6.组织病理学检查

(1)光镜检查:肿瘤坏死多见于下部，坏死区常可见钙化。血管壁上常可见碱沉积，一般认为是死亡肿瘤细胞释放的DNA。视网膜母细胞瘤根据显微镜下肿瘤细胞的变化可分为未分化型和分化型:①未分化型:肿瘤细胞排列不规则；细胞形态差异很大，可以是圆形、椭圆形、多边形或不规则形。细胞质少，细胞核大且深染，核分裂像多见，恶性程度较高。由于肿瘤生长迅速，血供不足，远离血管的肿瘤组织可坏死，而血管周围存活的肿瘤细胞可呈珊瑚状或指套状排列，称为伪菊花排列。②分化型:主要体征为菊花样结构。一种是Flexner-Wintersteiner菊花型:肿瘤细胞呈方形或低柱状，围绕中央空腔形成菊花状排列。细胞核位于远离中央腔的一端，相对较小，胞质较多，核分裂像较少，恶性程度较低。这种菊花是视网膜母细胞瘤所特有的。第二种是霍默-赖特菊花:细胞围绕一组神经纤维呈放射状排列。这种类型的菊花在神经母细胞瘤和神经母细胞瘤中仍可见到。Fleurettes:光感受器样成分呈花瓣状伸入中央腔，可见于分化较好、恶性程度较低的病例。

(2)超微结构:未分化的视网膜母细胞瘤细胞排列紧密，无间质，偶尔可见中间连接。细胞形态差异大，细胞核大，多形性，多核及多核现象，细胞质少，游离核糖体丰富。具有光感受器分化成分的肿瘤细胞呈环状排列，中央有含透明质酸酶的酸性粘多糖腔，相邻细胞间以中间连接相连。肿瘤呈柱状，核小，位于远离中央腔的一端。每个细胞只有一个细胞核和一个核仁。细胞质多，主要细胞器有线粒体、微管、粗面内质网和高尔基体。有些细胞突起有纤毛伸入中央腔内，其横切面呈9° 0形，有些纤毛呈球形膨大结构，有少数平行膜结构。上述结构与正常视网膜感光细胞相似，因此可以认为视网膜母细胞瘤起源于视网膜胚胎细胞。

(3)免疫组织化学:视网膜母细胞瘤起源于神经元还是胶质细胞是一个长期存在争议的问题，至今没有定论。免疫组织化学染色显示，大多数肿瘤细胞具有神经元分化(如神经元特异性烯醇化酶染色阳性)和胶质细胞分化(如GFAP染色阳性)的特征。在视网膜母细胞瘤的转基因小鼠模型中，肿瘤均来自内颗粒层，且往往具有无外生细胞的特点。合理的解释是，视网膜母细胞瘤可能起源于更原始的视网膜细胞——视网膜母细胞瘤，它可以分化为神经元和胶质细胞。

1.眼眶X线照片视网膜母细胞瘤在眼眶X线照片上可显示异常钙化。

2.超声探查孩子看斜视或“猫眼”时，肿瘤一般较大。超声检查有典型表现，对诊断有重要意义。肿瘤通常是钙化的，表现为反射亢进并伴有声学阴影。少数肿瘤生长过快，液化坏死无钙化，为低反射。眼球可以是正常的，也可以是增大的，眼轴的测量可以鉴别出眼轴短的白瞳(原始玻璃体增生)。肿瘤可以是单发的也可以是多发的。弥漫型少见，表面轮廓不规则，无钙化。因为孩子在检查时不合作，所以经常使用镇静剂。双眼都要检查，必要时重复检查。

视网膜母细胞瘤(伴钙化)的超声诊断依据(图1和图2):

a型:①极高反射(坏死液化区为超低反射)；②单一回波源；③声音和阴影。b型:①视网膜组织破坏；②不规则肿块；③声音和阴影。

3.计算机断层扫描(CT扫描)和磁共振扫描(MRI扫描)CT和MRI扫描不仅可以发现和描绘肿瘤的位置、形状和大小，还可以检测肿瘤扩散到眼球引起的视神经扩大、眼眶肿块和颅内转移。CT扫描还可显示肿瘤内钙化，对诊断有重要参考价值。(1)眼部高密度肿块:(2)肿块内有钙化点，30 ~ 90%病例可作为诊断依据；(3)视神经增粗，视神经孔扩大，说明肿瘤已经扩散到脑部。

4.眼底图像采集。定期对眼底肿瘤进行拍照、录像，有助于诊断和病情判断，能很好地指导治疗。目前广泛使用的是广角眼底相机RETCAM，可以在手术中使用。

5.大体分类一般肉眼可见视网膜内黄色、白色肿瘤，常可见致密钙化。根据肉眼观察，视网膜母细胞瘤有三种类型:①内源性:肿瘤起源于视网膜内核层，长入玻璃体，早期眼底检查容易发现；②外源性型:肿瘤起源于视网膜外核层，沿视网膜下间隙和脉络膜方向生长，导致视网膜脱离。眼底镜检查早期很难发现肿瘤肿块。③浸润型:肿瘤弥漫性浸润整个视网膜，无明显肿块。它占所有视网膜母细胞瘤的1.5%，其中大多数是非遗传性视网膜母细胞瘤。

眼底荧光血管造影:早期为动脉期，肿瘤显示荧光，静脉期增强，可渗入肿瘤组织。因为荧光褪色较晚，所以在诊断中相当有价值。

其他:也可用于同位素扫描、巩膜透视、癌胚抗原等。

Rb发展到第三期或第四期后一般很容易确诊，但在第一期或第二期就比较难了。在这一时期，其晶状体后瞳孔区可出现白色反射或黄白色组织块，称为白瞳。